Glicerofosfato de magnésio: Pode ser usado como um intensificador de nutrientes para aditivos farmacêuticos e alimentares.
Propriedades físicas e químicas do glicerofosfato de magnésio
Ponto de ebulição: 488,7ºC a 760 mmHg
Fórmula molecular: C3H7MgO6P
Peso molecular: 194,363
Ponto de fulgor:249,4ºC
Massa exata: 193,983063
PSA:122.69000
Armazenamento em temperatura ambiente, seco e selado
Existem muitos métodos para a determinação de glicerol, o mais comumente usado é o método químico. O custo do método químico é baixo, mas a operação é complicada, a quantidade de reagentes é grande, o tempo é longo e, às vezes, o erro é grande. A determinação enzimática de glicerol é altamente específica e só reage especificamente com glicerol em solução, mas o reagente necessário é caro, o que não é propício para aplicação industrial e detecção de um grande número de amostras. O método mais sensível para determinar glicerina livre é a cromatografia gasosa,
Cromatografia líquida, alta precisão, mas precisa silanizar o glicerol, operação problemática, alto custo. Como o método de alto teor de iodo é muito afetado por impurezas (açúcares e polióis) no líquido de fermentação, especialmente quando o teor de glicerol na fermentação é baixo, o método de detecção é basicamente impreciso: a cromatografia líquida de alto desempenho é precisa, mas a carga de trabalho do pré-tratamento da amostra de fermentação é grande e não é adequada para produzir um grande número de amostras. Portanto, o uso do método do eletrodo enzimático para determinar o teor de glicerol no líquido de fermentação tem alta velocidade e forte especificidade, porque a enzima imobilizada pode ser reutilizada, uma única detecção tem um custo menor do que o método colorimétrico enzimático.
1. Método do ácido periódico
Princípio: O método de oxidação de ácido periódico é um método comum para a detecção do teor de glicerol atualmente, o uso de ácido periódico e reação de reoxidação de glicerol, o ácido periódico restante e a reação de ácido iódico gerado com reação de iodeto de potássio para produzir iodo e, em seguida, titulação com tiossulfato de sódio, de acordo com a quantidade de tiossulfato de sódio consumido para calcular o teor de glicerol. 2. O líquido de fermentação 1{{10}}m1 é dissolvido em um pequeno béquer de 100 mL com uma pequena quantidade de água, então transferido para um frasco volumétrico de 100 mL, diluído com água até a linha, bem agitado e deixado em repouso. Use uma pipeta para remover com precisão 10 mL da solução acima para o frasco de medição de iodo, adicione 20 m de solução de periodato de sódio, misture uniformemente, deixe no escuro por 40 min longe da luz, então adicione 15 mL de solução de iodeto de potássio e 20% de solução de ácido clorídrico, ajuste o valor do pH entre 0,8 e 1,0 e então titule com solução padrão de tiossulfato de sódio. Perto do final, 2 solução indicadora de amido foi adicionada e titulada até que a cor azul da solução desaparecesse. Ao mesmo tempo, faça o branco da amostra.
2, colorimetria enzimática
1. Princípio: É um método enzimático para a determinação de glicerol estabelecido pela reação catalítica específica de enzimas, que se refere à conversão de glicerol em 3-fosfato glicerol sob a ação da glicerol quinase, que é catalisada pela fosfoglicerol oxidase para gerar fosfato de acetona dilight e peróxido de hidrogênio. Então o peróxido de hidrogênio e 4-aminopirina, 4-clorofenol reagem sob a catálise da peroxidase para produzir cor roxa e azul, podem ter um pico de absorção característico em cerca de 500m da imina, através da profundidade de cor, ou seja, a determinação da mudança de absorbância do H,O, conteúdo de glicerina gerado e H0 é proporcional ao gerado, de modo que o método colorimétrico pode ser usado para determinar o conteúdo de glicerina.
2. Procedimento de operação Comprimento de onda: 500 nm (480 ~ 520 nm) Temperatura de reação: 37 ° C Copo colométrico Diâmetro da luz: 1 cm Pegue uma certa quantidade de R1 (veja a etiqueta do frasco R2) e adicione a um frasco de R2, que é o líquido de trabalho após a dissolução, e o líquido de trabalho é pré-isolado à temperatura de teste
3, cromatografia líquida de alta eficiência
Princípio: O princípio da cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) é baseado no líquido como fase móvel, o uso de sistema de infusão de alta pressão, o solvente único com polaridade diferente ou proporções diferentes de solventes mistos, tampões e outras fases móveis são bombeados para a coluna equipada com uma fase fixa, a coluna é usada para separar a mistura de teste primeiro e, em seguida, detectar, de modo a atingir a análise da amostra. Portanto, a precisão e a exatidão da medição são altas e se tornou um método comumente usado para detectar moléculas bioquímicas. 2. Procedimento
(1) Primeiro, a solução de fermentação foi diluída 2,5 vezes com água e, em seguida, HPO foi adicionado para ajustar H para 55 a uma velocidade de rotação de 8000r/min e uma temperatura de 4C por 10min e, em seguida, filtrada por membrana de filtração microporosa para análise por HPLC: (2) A solução da série padrão de glicerol foi realizada por HPLC nas melhores condições cromatográficas Análise, usando o método padrão externo da área do pico para quantificar a curva padrão de glicerol:
(3) Após o pré-tratamento da amostra, 5 µl foram injetados, a área do pico foi registrada, substituída na equação linear e seu valor medido foi calculado. O valor calculado é multiplicado pelos tempos de diluição para obter o conteúdo de glicerol na solução de fermentação.
4, Cromatografia gasosa
1. Princípio: A cromatografia gasosa é um método para separar e analisar compostos em amostras complexas. O princípio é que uma certa quantidade de gás ou analito líquido é injetada na boca de injeção em uma extremidade da coluna, impulsionada pelo gás transportador através da coluna, e as moléculas do analito serão adsorvidas pela parede da coluna ou pelo empacotamento na coluna. Como diferentes amostras têm diferentes propriedades físicas e químicas e têm diferentes interações com fases estacionárias específicas, cada tipo de molécula tem sua própria taxa de passagem, de modo que vários componentes do analito chegarão ao final da coluna em momentos diferentes e, portanto, serão separados. Quando os compostos fluem para fora do final da coluna, eles são detectados pelo detector, produzindo o sinal correspondente, que é convertido em uma saída elétrica, determinando assim a ordem de tempo em que cada componente chega ao final da coluna e a quantidade de cada componente.
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